酶联免疫底物Trinder's试剂与TMB

发布时间:2021-09-30

 酶联免疫分析是体外诊断技术中使用普遍且应用时间比较久的一种分析检测技术,其用到的设备仪器简单,各种实验环境下都可以操作,灵敏度也比较高,具有多方面的优势。酶联免疫所使用的底物除了大家熟知的ELISA中的TMB之外,还有新型Trinder’s试剂等。

    色原底物新型Trinder’s试剂

    新型Trinder’s试剂是在传统Trinder’s试剂的基础上通过官能团的取代优化改进而来,稳定性和灵敏度更好。它的种类很多,目前德晟已经研发并销售的有9种,包括TOOS、TOPS、MAOS、ADPS等等。不同的Trinder’s试剂的氧化产物,其蕞大吸收光波长和摩尔吸光系数不一样,分别适用于不同生化指标的检测。

    Trinder’s试剂检测原理

    Trinder’s试剂属于HRP的氧化耦联色原底物对,和4-氨基安替(4-AAP)比邻耦联氧化显色(也可用2-甲基-2苯并噻唑啉酮腙MBTH,但应用较少)。在H202存在下,4-氨基安替比林和新型Trinder’s试剂经HRP作用缩合形成红色的醌亚胺类物质,其在特定波长处有zui大吸收,大于540nm,检测波长紫外区,干扰少。

    色原底物TMB

    TMB即四甲基联苯胺,是ELISA试剂盒中所使用的酶联免疫底物。它属于一种氧化还原色原底物,其氧化产物联苯醌在波长450nm(吸收光为蓝光)处有蕞大消光系数。当酶HRP量少,过氧化氢溶液和TMB过量时,则形成蓝色的阳离子根,降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌。硫酸作为终止剂可使产物稳定90min,1%SDS作为终止剂可使鲜蓝色24h内保持不变,但有较强的褪色作用。

    新型Trinder’s试剂与TMB相比,成本更高一些,不如TMB适用广泛,不过它们的吸收波长要更高,MAOS试剂更是达到了630nm。除了上述的色原底物之外,德晟还可以提供检测中所需要的各种酶制剂。


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